HiMedia FD761-1VL Добавка к среде Левенштейна-Йенсена с ПАСК (1 фл.х5 г)

HiMedia FD761-1VL Добавка к среде Левенштейна-Йенсена с ПАСК (1 фл.х5 г) (ФСЗ 2009/03708)

Селективная добавка с антибиотиком резервного ряда для культивирования микобактерий туберкулеза, устойчивых к парааминосалициловой кислоте

Добавки содержат чистые субстанции (стерильный порошок) противотуберкулезного препарата. Для определения лекарственной чувствительности микобактерий методом абсолютных концентраций следует использовать основу среды Левенштейна–Йенсена (без крахмала) М1542, определение устойчивости проводят в соответствии с приказом №109 от 23 марта 2003 года (Приложение 11). Готовый раствор можно использовать для непосредственного внесения в плотную питательную среду, либо пропитывать им бумажные полоски, например, для дифференцирующего ниацинового теста: Индикаторные бумажные полоски размером 60x80 мм готовят из фильтровальной бумаг. Один конец полоски отмечают простым карандашом. Оттянутыми пастеровскими пипетками на полоски наносят по 1 капле свежеприготовленных растворов в следующем порядке: - 20% раствор ПАСК - на отмеченный карандашом конец полоски; - 60% раствор роданистого калия - на середину полоски; - 50% горячий раствор хлорамина "Б" - на свободный конец полоски. Между каплями должны оставаться сухие промежутки. Индикаторные полоски высушивают в темноте при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем для получения более четких результатов наносят повторно 1 каплю хлорамина "Б" на уже высохшую каплю этого раствора. Просушивают, помещают в пробирки, закрывают резиновыми пробками и хранят в холодильнике. Полоски пригодны к употреблению в течение 3 месяцев. Процедура исследования: Добавить в пробирку с исследуемой культурой микобактерий 1-1,5 мл стерильной дистиллированной воды. При наличии сливного роста проткнуть поверхность среды в нескольких местах пипеткой для облегчения доступа раствора к питательной среде. Поместить пробирку в термостат на 2-3 часа в полугоризонтальном положении с тем, чтобы жидкость покрывала всю поверхность среды. Вынуть пробирку из термостата и перевести ее в вертикальное положение, позволив жидкости стечь на дно в течение 5-6 минут. В чистую стерильную пробирку перенести пипеткой 0,5-0,6 мл экстракта. Индикаторную полоску помеченным карандашом концом, на который нанесена ПАСК, опустить с помощью пинцета в пробирку с экстрактом, не допуская смачивания экстрагирующей жидкостью средней части полоски, на которую был нанесен роданистый калий, и немедленно закрыть пробирку резиновой пробкой. Оставить при комнатной температуре на 15-30 минут. Допустимо осторожно покачивать пробирку, пока вся полоска не пропитается экстрактом. Наблюдать за окрашиванием жидкости на дне пробирки на белом фоне. При положительном ниациновом тесте экстракт окрашивается в желтый цвет разной интенсивности. Любая окраска индикаторной полоски не принимается во внимание, так как это может происходить вследствие окисления реактивов в верхней части полоски. Для дегазации пробирок после проведения реакции пользуются 10% раствором нашатырного спирта, 10% раствором едкого натра или любым щелочным дезинфицирующим средством